５月と６月に出た記事を３つご紹介します．Ｋａｗａｓｈｉｍａ先生らの論文の問題点はＭＭＲ・自閉症・腸炎（８）で詳しくご紹介しましたが，文献１はＰＣＲのコンタミであろうと一蹴しています．文献２は2000年６月にイリノイ州のオークブルックでおこなわれたアメリカ小児科学会の学際的学会の報告書です．文献３はＭＭＲ・自閉症・腸炎（14）でご紹介しましたＤａｌｅｓのＪＡＭＡ論文に対する質問と解答です．

炎症性腸疾患と自閉症例の腸組織の麻疹ウイルス持続感染について（文献１）

Ｋａｗａｓｈｉｍａらによる論文（Ｄｉｇ Dis Sci ４５:723-729, 2000）は我々にとっては興味あるものであった．炎症性腸疾患と自閉症のケースで，RT-PCR法で臨床検体に麻疹ウイルスのゲノム配列が存在することを指摘した最初の論文である．対照的に，我々の検討を含め，これまでにいくつかの研究グループから報告された論文では，どの論文でも，炎症性腸疾患や非炎症性腸疾患例からのいろいろな臨床検体に麻疹ウイルスの持続感染を証明することはできなかった．

Ｋａｗａｓｈｉｍａらが報告したデータでは，クローン病患者の12.5％，潰瘍性大腸炎患者の33.3％で，麻疹ウイルスが検出されている．これが真実であれば，これまでに同じ方法で発表されている症例数に当てはめると，56例のクローン病検体から少なくとも７例，33例の潰瘍性大腸炎検体から少なくとも11例において麻疹ウイルスが検出されることになる．末梢血の血球成分が検討されているものでは，クローン病が16例で潰瘍性大腸炎が11例であるので，それぞれ２例および４例が麻疹ウイルス陽性ということになるはずである．ところが，実際は，これらの過去の報告例はＫａｗａｓｈｉｍａらの方法よりもより厳密で感度が高いにもかかわらず，全例がRT-PCRで麻疹ウイルスが検出されていなのである．Ｋａｗａｓｈｉｍａらは過去の論文が麻疹ウイルスを検出できていない理由を，過去の論文がRT-PCRのゲノム上のターゲットを例えばＮ遺伝子などにしているため，原因は不明であるが検出できていなのであろうと主張している．これは誤解であり，ほとんどの過去の論文はRT-PCRのターゲットを複数の部位に設定している．事実，いくつかの研究はKawashimaらと同じ場所（Ｈ遺伝子）をターゲットとしているにもかかわらず，全例が陰性なのである．ゆえに，これまでに公表されてきたいくつかの論文の結果と，Ｋａｗａｓｈｉｍａらの結果は，クローン病と潰瘍性大腸炎に関しては明らかに矛盾しているのである．自閉症ケースに関しては過去の報告はない．

我々は，Ｋａｗａｓｈｉｍａらの研究では，コントロールとして使用した麻疹ウイルスか，あるいはあらかじめ存在していたＤＮＡテンプレートによる交差コンタミネーションが起こったのではないかと考える．おそらく１株以上のコンタミで，過去においても研究室のコンタミネーションの一番の原因となるnested ＰＣＲ増幅法の際のコンタミネーションであろう．この予想は炎症性腸疾患や自閉症例から検出されている遺伝子配列が野生株やワクチン株の遺伝子配列と明白に区別できない事実からも支持されている．Ｋａｗａｓｈｉｍａらの表２の遺伝子配列に基づくと，クローン病ケースから分離された遺伝子配列はワクチン株とは２つの塩基のみが異なっており，自閉症から分離された配列は理論的にはワクチン株と一致するはずであるのが，３から４塩基異なっている．遺伝子配列に基ずく系統発生解析を，いくつかのワクチン株や野生株と行ってみても，症例の臨床歴と麻疹ウイルスの遺伝子配列の間の関連を確認することは不可能である．

Ｋａｗａｓｈｉｍａらの論文の表１と表２に記載されている遺伝子配列にはいくつかの相違がある．この相違は8409，8419，8447，8492，8590の位置で明白である．これらが報告上のエラーなのかあるいは同じサンプルを使った異なるＰＣＲ産物における真の配列バリエーションなのかは不明である．しかし，このような相違は，ＰＣＲ産物におけるＤＮＡフラグメントの混在があったことを示す良い指標である．通常はこれは一つ以上のテンプレートの交差コンタミネーションで起こり，解決策はテンプレートのクローニング後のシークエンシングである．

加えて，Ｋａｗａｓｈｉｍａらの論文には重要な部分で欠落している情報があり，研究の信頼性を落としている．例えば，クローン病１例，潰瘍性大腸炎１例，自閉症３例の計５例でＨ遺伝子領域が陽性としているが，Ｆ遺伝子領域の遺伝子配列に関しては１例のも報告している．他のサンプルはＦ遺伝子領域について検討しなかったのか，あるいは検討したが陰性だったのかが記載されていない．同様に陽性コントロールの由来についても記載がない．

麻疹ウイルスの遺伝子が残存し，多くの疾患の原因になる可能性は繰り返し取り上げられたが，今のところＳＳＰＥ以外では科学者たちにとっては説得力はない．Ｋａｗａｓｈｉｍａらの結果は矛盾が多く，他の報告とは一致せず，説得力のあるものとは思えない．

ＭＭＲワクチンと自閉症スペクトル：２０００年６月の小児予防接種会議（イリノイ州，オークブルック）における報告（文献２）

（背景）親や医師が自閉症の原因や治療について気にかけているのは当然のことである．自閉症は深刻な状態であり，家族全体に影響を与える状態なのである．自閉症に関する研究は進んではいるが，自閉症の原因について我々が知っていることと，自閉症を予防するための具体策の間には大きなギャップが存在する．自閉症症候にはスペクトルがあり，しばしば自閉症スペクトルと表現される．ＭＭＲと炎症性腸疾患と自閉症（特に退行型）の間に関連があるのではという指摘は議論を呼んでいる．また，自閉症スペクトルの発生率の増加の可能性に関連して，自閉症スペクトルに関する教育サービスの需要が増加している．

（方法）2000年６月12日から13日に，アメリカ小児科学会は，｢小児予防接種における新しい挑戦｣と題した学会をイリノイ州のオークブルックで開いた．この学会において，親，臨床医，そして科学者たちはＭＭＲワクチンと自閉症スペクトルに関する情報や研究結果を発表した．参加者はアメリカ小児科学会専門委員会および部門の代表や，合衆国およびその他の関連機関の代表も含まれていた．学際的な専門家のパネリストたちが，自閉症の病因，疫学，遺伝学などについてレビューし，炎症性腸疾患と麻疹とＭＭＲワクチンの間の仮説的関連についての入手可能なデータを総括した．仮説を提供した著者や関連する領域におけるほかの専門家たちからは，求められた補足情報が提供された．

（結果）自閉症は複雑な障害であって，未知のおそらく複数の原因によるものであろう．自閉症スペクトルになり易くする遺伝子は，10個はあるであろう．多くの専門家たちが，自閉症において起こる脳の発達異常は多くの場合，受精30週よりも前に起こるであろうと信じている．胎児期の風疹暴露は自閉症の原因のひとつとして知られている．動物モデルでは，未知の感染や他の環境因子への暴露が自閉症スペクトルの原因となる可能性を示唆している．

いくつかの因子が，最近の自閉症スペクトルの発生率の明らかな増加に寄与しているであろう．多くのデータは，自閉症への理解が進み報告数が増加したことが一番の因子であることを示している．しかし，疫学的データは自閉症スペクトルの発生率が真に増加してきたのかどうかについては結論をだせないでいる．最近の自閉症スペクトル報告例の増加は，アメリカでは1971年にＭＭＲワクチンが導入され1970年代に12ヶ月から15ヶ月での接種がルーチン化された後，時間をおいて起こっている．自閉症スペクトルの真の発生率や罹患率を確認するためには，適切で詳細な研究が必要である．ヨーロッパにおける疫学研究は，ＭＭＲワクチンと自閉症スペクトルの間に何の関連もないことを示している．

自閉症スペクトル児の中には消化管症状のある児も含まれているが，自閉症スペクトル児の中に特殊な消化管疾患が増加しているという確証はない．炎症性腸疾患や消化管症状を持つ自閉症児の腸組織検体から麻疹ウイルスを検出するための検討では技術的な統一が成されていない．いくつかの研究グループは炎症性腸疾患の腸組織から麻疹ウイルスは検出できないとしているが，２つの研究グループは異なる技術を使い麻疹ウイルスの存在を示している．この２つのうちの１つ（Ｋａｗａｓｈｉｍａら）は，消化管症状を呈する自閉症児の末梢血リンパ球にも麻疹ウイルスの遺伝子配列の一部を検出したと報告している．これは因果関係の証拠ではなく，ウイルスが持続感染していても何も起こらないこともあり得る．コントロール研究をいくつかの研究施設で追加する必要がある．

（結論）ＭＭＲワクチンと自閉症との関連の可能性は，多くの人々と行政が関心を寄せ，個人的な経験に基づく独自の結論に至ったたくさんの人々が存在するが，ＭＭＲワクチンが自閉症やその関連状態や炎症性腸疾患の原因であるとする仮説を支持する証拠は今のところない．麻疹，おたふくかぜ，風疹のそれぞれのワクチンを別々に接種する方法は，一度にＭＭＲワクチンとして行うことと比べて利点はなく，別々の接種ではかえって接種時期が送れてしまったり，抵抗力が獲得できない可能性がある．小児科医は家族と共に，子供たちが２歳までにこれらの予防可能な病気に罹らないように努力しなければならない．自閉症スペクトルの原因を突き止めるためには，そのために必要な科学的な努力を続ける必要がある．